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什么是賽默飛?Varioskan LUX酶標儀

發(fā)布時間:2025/4/2點擊次數(shù):12

賽默飛Varioskan LUX酶標儀簡介與使用說明

一、儀器概述

Varioskan LUX是賽默飛公司推出的一款多功能光學檢測系統(tǒng),屬于多模式酶標儀。它支持多種檢測模式,包括吸光度(Absorbance)、熒光強度(Fluorescence Intensity)、時間分辨熒光(Time-Resolved Fluorescence, TRF)、發(fā)光(Luminescence)、熒光偏振(Fluorescence Polarization, FP)以及AlphaScreen/AlphaLISA等技術(shù)。適用于生物化學、細胞學、分子生物學等研究領(lǐng)域的數(shù)據(jù)采集和分析。

Varioskan LUX采用模塊化光學系統(tǒng),結(jié)合自動化功能、觸控操作界面和軟件平臺SkanIt,滿足科研與高通量檢測需求。其設(shè)計強調(diào)用戶體驗簡化與操作靈活性,適配多種微孔板格式(96孔、384孔、1536孔)以及單管檢測。


二、基本原理

Varioskan LUX的工作基于光學檢測原理。不同檢測模式對應(yīng)不同的光源、探測器與光路設(shè)置:

  1. 吸光度測量:通過測量樣品對入射光的吸收程度,反映樣品中物質(zhì)濃度。使用氙燈為光源,結(jié)合可變波長單色器進行波長掃描。

  2. 熒光檢測:熒光探針在激發(fā)光作用下發(fā)出特定波長的發(fā)射光,儀器通過濾光或單色器檢測其強度。適合用于蛋白標記、核酸檢測等實驗。

  3. 時間分辨熒光(TRF):利用發(fā)光延遲特性,提高信噪比,常用于稀有元素標記(如銪)的免疫分析。

  4. 發(fā)光檢測:無需激發(fā)光源,直接檢測化學反應(yīng)或生物發(fā)光產(chǎn)生的光信號,常用于酶促反應(yīng)或細胞活性分析。

  5. AlphaScreen技術(shù):基于供體和受體微珠間的能量傳遞,實現(xiàn)無洗滌的高靈敏度檢測。


三、儀器組成

Varioskan LUX主要由以下部分構(gòu)成:

  1. 檢測光學系統(tǒng):包含氙燈、LED光源、單色器、濾光片、探測器等,用于實現(xiàn)多模式檢測。

  2. 微孔板模塊:自動托盤系統(tǒng)支持多種孔板格式,并可進行控溫(室溫至+65°C)與震蕩功能。

  3. 自動化接口:支持機械臂對接,實現(xiàn)自動進板和連續(xù)檢測。

  4. 控制界面:配有內(nèi)置觸控屏,可本地設(shè)置參數(shù)或通過SkanIt軟件在計算機端控制。

  5. 數(shù)據(jù)分析系統(tǒng):SkanIt軟件支持實驗設(shè)計、數(shù)據(jù)采集、計算、標準曲線擬合及報告輸出。


四、操作流程

1. 儀器準備

  • 開機與自檢:連接電源與計算機,開啟主機,儀器自動進行系統(tǒng)自檢,檢查光源、機械托盤與溫控系統(tǒng)狀態(tài)。

  • 軟件初始化:啟動SkanIt軟件,確認儀器已連接,并進入實驗設(shè)置界面。

2. 實驗設(shè)置

用戶需在軟件中進行以下設(shè)定:

  • 板型選擇:選擇使用的孔板格式(如96孔、384孔)。

  • 檢測模式選擇:根據(jù)實驗類型設(shè)定吸光度、熒光、發(fā)光等檢測方式。

  • 波長選擇:輸入所需激發(fā)波長與發(fā)射波長(對于熒光模式),或測量波長(對于吸光度)。

  • 讀取參數(shù)設(shè)置:如讀取高度、讀取次數(shù)、讀取順序等。

  • 溫控設(shè)置(如需要):設(shè)定孵育溫度及持續(xù)時間。

  • 震蕩模式:選擇線性、軌跡式或雙向震蕩,并設(shè)定持續(xù)時間與速度。

3. 樣品準備與裝載

  • 將樣品加至孔板中,避免邊緣效應(yīng)與氣泡影響。

  • 將孔板正確放入托盤,確保方向一致(A1孔朝左上)。

  • 在軟件中點擊“讀取",儀器自動啟動檢測。

4. 數(shù)據(jù)采集與分析

  • 檢測過程中,實時顯示原始數(shù)值或信號曲線。

  • 軟件可進行標準曲線構(gòu)建、濃度計算、數(shù)據(jù)校正與歸一化處理。

  • 支持多組重復實驗、平均值計算與標準差統(tǒng)計。

  • 數(shù)據(jù)可導出為CSV、Excel、PDF等格式,并可自定義報告模板。


五、主要功能與技術(shù)參數(shù)

功能/參數(shù)說明
吸光度波長范圍200–1000 nm(步長1 nm)
熒光激發(fā)/發(fā)射波長范圍200–850 nm
兼容板型6–1536孔板,兼容定制格式
溫控范圍室溫至65°C,可編程恒溫
檢測速度96孔板約15秒,384孔板約1分鐘
發(fā)光檢測動態(tài)范圍10^9 以上
自動化接口支持LIMS系統(tǒng)與機械臂對接
軟件功能曲線擬合、條件篩選、統(tǒng)計分析、多語言支持

六、應(yīng)用領(lǐng)域

Varioskan LUX廣泛應(yīng)用于多個研究方向:

  1. 細胞生物學:細胞活力檢測、凋亡分析、熒光標記蛋白研究。

  2. 免疫檢測:ELISA、AlphaLISA、高靈敏抗體篩選。

  3. 基因分析:熒光定量PCR前期反應(yīng)驗證、核酸雜交實驗。

  4. 藥物篩選:高通量篩選化合物對酶或受體的作用。

  5. 環(huán)境檢測:污染物光學信號檢測、化學反應(yīng)動力學研究。


七、日常維護與注意事項

1. 日常維護

  • 每日開機前檢查濾光系統(tǒng)與托盤是否干凈。

  • 使用完畢后關(guān)閉光源,避免長期曝光。

  • 定期清潔檢測窗口與板托,避免液體殘留。

  • 每季度檢查校準狀態(tài),必要時聯(lián)系廠商進行專業(yè)校準。

2. 注意事項

  • 使用前詳細閱讀使用手冊,熟悉各項安全規(guī)定。

  • 在使用高敏模式時,盡量避免環(huán)境光干擾。

  • 樣品體積需滿足檢測要求,避免低液面干擾。

  • 切勿在運行中強行取出板托,避免損傷機械系統(tǒng)。


八、故障排查簡表

問題可能原因解決方法
不啟動/死機電源未接穩(wěn)、系統(tǒng)崩潰檢查插頭,重啟軟件
光源不亮燈泡壽命耗盡或松動更換燈泡或重新安裝
讀數(shù)波動大孔板氣泡、樣品未混勻去除氣泡,重做實驗
軟件無法識別儀器USB端口故障、驅(qū)動未更新更換端口或更新驅(qū)動

九、總結(jié)

Varioskan LUX酶標儀作為一款多模式光學檢測平臺,適配多種科研與應(yīng)用場景。其檢測模式全面,操作界面友好,數(shù)據(jù)處理功能豐富,適合從基礎(chǔ)研究到高通量篩選的多種實驗需求。正確掌握儀器功能、規(guī)范操作流程、按時進行維護,有助于確保數(shù)據(jù)準確性與實驗穩(wěn)定性。

如需更高級的使用技巧,如腳本自動控制、結(jié)果批處理、復雜曲線擬合等,建議參考SkanIt高級手冊或參加相關(guān)技術(shù)培訓,以充分發(fā)揮該系統(tǒng)的性能。


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