熒光素酶發(fā)光底物Furimazine（Fz）1 mg是一種高效能的熒光素酶發(fā)光底物，廣泛用于生物發(fā)光成像（bioluminescence imaging）和其他相關(guān)研究領(lǐng)域。它的化學(xué)結(jié)構(gòu)和反應(yīng)機制使其成為基于NanoLuc®熒光素酶（NanoLuc® Luciferase）的發(fā)光系統(tǒng)中的核心成分。下面是關(guān)于Furimazine的詳細介紹。

1. 熒光素酶發(fā)光底物Furimazine（Fz）1 mg：化學(xué)性質(zhì)與結(jié)構(gòu)特點

Furimazine 的化學(xué)分子式為C??H??N?O?，是一種復(fù)雜的芳香族化合物。它屬于吡咯并[3,2-b]吡咯類衍生物，具有多個取代基位點。這些結(jié)構(gòu)特點使Furimazine在與NanoLuc®熒光素酶反應(yīng)時能夠產(chǎn)生強烈而穩(wěn)定的發(fā)光信號。

與其他傳統(tǒng)的熒光素酶底物不同，F(xiàn)urimazine 在使用過程中展現(xiàn)出的量子效率和靈敏度。其化學(xué)穩(wěn)定性使其在實驗條件下不易降解，能夠長時間保持其發(fā)光能力。這一特性在長時間的生物發(fā)光成像實驗中尤為重要，因為它可以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

2. 生物發(fā)光機制

Furimazine 是NanoLuc®熒光素酶系統(tǒng)的專用底物。在發(fā)光反應(yīng)中，F(xiàn)urimazine 被NanoLuc®熒光素酶氧化，生成一種激發(fā)態(tài)的中間體，該中間體隨后通過放射光子的方式回到基態(tài)，從而產(chǎn)生生物發(fā)光信號。這個發(fā)光過程具有以下幾個顯著特點：

• 高靈敏度：Furimazine 與NanoLuc®熒光素酶的反應(yīng)非常高效，能夠檢測到極低濃度的熒光素酶，因此適用于低表達水平的基因或蛋白質(zhì)的檢測。

• 快速響應(yīng)：Furimazine 在加入熒光素酶后迅速發(fā)生反應(yīng)，幾乎即時產(chǎn)生發(fā)光信號，這對于需要快速數(shù)據(jù)獲取的實驗非常有利。

• 長信號持續(xù)時間：發(fā)光信號能夠持續(xù)較長時間，允許研究人員在較長的時間窗內(nèi)進行信號捕捉和分析。

3. 應(yīng)用領(lǐng)域

3.1 活體成像

Furimazine 主要用于活體生物發(fā)光成像。其強大的發(fā)光性能使其在小動物模型的體內(nèi)成像中表現(xiàn)出色，能夠幫助研究人員可視化和量化活體動物體內(nèi)的基因表達、細胞追蹤以及病理狀態(tài)的變化。例如，在腫瘤模型中，F(xiàn)urimazine 能夠清晰地顯示腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移過程，為癌癥研究提供了重要的數(shù)據(jù)支持。

3.2 高通量篩選

在藥物研發(fā)中，F(xiàn)urimazine 被廣泛用于高通量篩選實驗。通過將Furimazine與NanoLuc®熒光素酶系統(tǒng)結(jié)合，研究人員可以快速篩選出對特定靶標(biāo)有作用的化合物。這種方法不僅提高了篩選效率，還減少了實驗材料的浪費，優(yōu)化了整個藥物篩選流程。

3.3 信號通路分析

Furimazine 在信號通路研究中的應(yīng)用也非常廣泛。通過報告基因系統(tǒng)，研究人員可以使用Furimazine檢測細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)事件。由于Furimazine的高靈敏度，即使是細微的信號變化也能被捕捉到，幫助研究人員深入了解復(fù)雜的細胞信號網(wǎng)絡(luò)。

4. 使用與操作

使用Furimazine進行實驗時，通常需要將其溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，如乙醇或DMSO（二甲基亞砜）。溶解后的Furimazine應(yīng)盡快使用，因為長時間存放可能導(dǎo)致發(fā)光效率的下降。實驗時應(yīng)確保Furimazine的溶液是新鮮配制的，并且在避光、低溫條件下保存。

Furimazine 與NanoLuc®熒光素酶的反應(yīng)條件通常包括室溫環(huán)境和生理pH值的緩沖液。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，F(xiàn)urimazine的發(fā)光反應(yīng)不需要額外的輔酶或添加劑，這使得實驗操作更加簡便和快速。

5. 注意事項與存儲

Furimazine 是一種敏感的化合物，在使用和存儲過程中需要注意以下幾點：

• 避光保存：Furimazine 對光敏感，長時間暴露在光線下可能會導(dǎo)致降解。因此，應(yīng)將其儲存在避光的容器中，并在暗處操作。

• 低溫存儲：Furimazine 應(yīng)存放在-20°C或更低的溫度下，避免頻繁的凍融循環(huán)，以保持其穩(wěn)定性。

• 避免與強氧化劑接觸：Furimazine在化學(xué)性質(zhì)上容易受到強氧化劑的影響，因此在實驗過程中應(yīng)避免與此類化合物接觸，以防止反應(yīng)失效或產(chǎn)生副產(chǎn)物。

6. 總結(jié)

Furimazine 作為NanoLuc®熒光素酶系統(tǒng)的核心發(fā)光底物，憑借其高靈敏度、快速響應(yīng)和穩(wěn)定性，在生物發(fā)光成像、高通量篩選以及信號通路研究等領(lǐng)域表現(xiàn)出了應(yīng)用價值。其性能使得研究人員能夠在各種復(fù)雜的生物系統(tǒng)中準(zhǔn)確地進行基因表達和蛋白質(zhì)活性分析。

隨著生物技術(shù)的發(fā)展，F(xiàn)urimazine 在未來的研究中將繼續(xù)扮演重要角色，推動生物發(fā)光技術(shù)在基礎(chǔ)研究和應(yīng)用開發(fā)中的進一步普及和深入應(yīng)用。無論是在藥物開發(fā)、疾病研究還是生物工程領(lǐng)域，F(xiàn)urimazine 都為科學(xué)家們提供了一個強有力的工具，有助于揭示生命過程中的關(guān)鍵機制。