賽默飛世爾 (Thermo Fisher Scientific) 的 Multiskan FC 酶標(biāo)儀 使用濾光片系統(tǒng)來選擇特定的波長進(jìn)行光吸收檢測。濾光片在酶標(biāo)儀中起著重要作用，它能夠篩選出特定波長的光束，確保儀器能精準(zhǔn)檢測樣品中發(fā)生的反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)可靠的定量分析。

1.  賽默飛世爾 Thermo FC酶標(biāo)儀：Multiskan FC 酶標(biāo)儀的濾光片概述

Multiskan FC 酶標(biāo)儀內(nèi)置了 6位濾光片輪，這意味著用戶最多可以安裝6個(gè)不同波長的濾光片，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要靈活選擇波長。濾光片的選擇非常重要，因?yàn)椴煌瑢?shí)驗(yàn)（如ELISA、蛋白質(zhì)定量、核酸定量等）可能需要不同波長的光進(jìn)行檢測。

常見的濾光片波長包括：

• 405 nm：通常用于黃酶類反應(yīng)的ELISA實(shí)驗(yàn)。

• 450 nm：常用于ELISA中基于酶反應(yīng)的光吸收檢測，尤其是用TMB（四甲基聯(lián)苯胺）作為底物時(shí)。

• 492 nm：也常用于ELISA中TMB底物的吸收峰檢測。

• 620 nm：作為參考波長，用于校正背景信號。

• 570 nm：用于檢測一些發(fā)色反應(yīng)，比如蛋白質(zhì)和細(xì)胞生長的分析實(shí)驗(yàn)（如MTT和XTT法）。

• 340 nm：適用于核酸、酶活性分析等紫外光區(qū)域的檢測。

2. 濾光片的工作原理

Multiskan FC 酶標(biāo)儀的光源發(fā)出的光經(jīng)過濾光片輪時(shí)，只會允許特定波長的光通過濾光片到達(dá)樣品。這些特定波長的光束會與樣品反應(yīng)后被儀器的檢測器接收并記錄吸光度值。不同的波長適用于不同的實(shí)驗(yàn)反應(yīng)，因此用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇適當(dāng)?shù)臑V光片進(jìn)行檢測。

3. 濾光片的更換和使用

Multiskan FC 酶標(biāo)儀支持用戶自行更換濾光片。由于濾光片位于6位濾光片輪中，用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活配置濾光片，具體步驟如下：

1. 拆卸和安裝：用戶可以通過打開濾光片輪蓋板，輕松取出或更換濾光片，確保在更換過程中保持濾光片的清潔。

2. 濾光片選擇：通過儀器的軟件（如SkanIt軟件），用戶可以在設(shè)置實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇對應(yīng)的波長，從而自動(dòng)調(diào)整濾光片以匹配所需波長。

4. 濾光片的常見應(yīng)用

濾光片的選擇對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。以下列舉了一些常見波長濾光片的應(yīng)用場景：

• 405 nm 濾光片：用于檢測堿性磷酸酶（ALP）的ELISA實(shí)驗(yàn)，也常用于一些發(fā)色底物的檢測。

• 450 nm 濾光片：常見于ELISA實(shí)驗(yàn)，尤其是在使用TMB作為底物時(shí)，適合于檢測各種抗體、抗原的免疫反應(yīng)。

• 492 nm 濾光片：與450 nm波長類似，適合檢測黃色發(fā)色反應(yīng)，常用于免疫反應(yīng)和細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)。

• 620 nm 濾光片：作為背景波長，用于校正樣品中的光學(xué)干擾，特別是透明度較低的樣品中。

5. 濾光片的選擇建議

根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求，選擇合適的濾光片非常重要。以下是一些選擇濾光片的基本建議：

• ELISA實(shí)驗(yàn)：通常需要450 nm或492 nm濾光片來檢測TMB底物的發(fā)色反應(yīng)，同時(shí)620 nm作為參考波長，用于消除噪音信號。

• 蛋白質(zhì)定量：對于蛋白質(zhì)定量實(shí)驗(yàn)（如Bradford法、BCA法），通常使用595 nm濾光片進(jìn)行檢測。

• 核酸檢測：對于核酸分析，常使用260 nm和280 nm的濾光片，340 nm波長的濾光片也可以用于檢測酶活性分析。

6. 如何維護(hù)濾光片

為了確保濾光片的長期穩(wěn)定性和使用壽命，定期進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)非常重要。以下是濾光片維護(hù)的一些建議：

• 保持清潔：使用時(shí)要避免指紋、灰塵或液體接觸濾光片表面，若有污染可用無絨布輕輕擦拭。

• 存放條件：濾光片在不使用時(shí)應(yīng)放置在干燥的環(huán)境中，并避免暴露在陽光下，以防濾光片表面的鍍膜層老化。

• 定期檢查：定期檢查濾光片是否有劃痕、損壞或其他影響光學(xué)性能的因素，并及時(shí)更換損壞的濾光片。

7.  賽默飛世爾 Thermo FC酶標(biāo)儀總結(jié)

賽默飛世爾 Multiskan FC 酶標(biāo)儀配備的濾光片系統(tǒng)為實(shí)驗(yàn)室提供了靈活的光學(xué)檢測選擇。通過安裝不同波長的濾光片，用戶能夠根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求精確選擇檢測波長，從而實(shí)現(xiàn)高精度的定量分析。無論是在ELISA、蛋白質(zhì)定量、核酸定量，還是細(xì)胞活性分析中，濾光片的選擇都是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。